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外泌体研究一站式解决计划


什么是外泌体 ?????

外泌体是由细胞渗透的直径为30~150nm的小囊泡,,,内含泉源于细胞相关的卵白质与核苷酸等生物分子,,,在细胞交流间起主要作用。。。。。。具有镌汰细胞凋亡、减轻炎症反应、增进血管天生、抑制纤维化、提高组织修复潜力等主要生物学功效。。。。。。其具有以下特征:

  • 典范的“杯托”形态
  • 内含的核苷酸包括DNA、mRNA、miRNA、lncRNA等
  • 险些保存于所有的体液、组织及细胞间隙中
  • 险些所有的细胞都能渗透外泌体
  • 差别细胞渗透的外泌体因素差别

外泌体有哪些功效 ?????

外泌体携带大宗特异性的卵白质(如细胞因子、生长因子)以及功效性的mRNA、miRNA等生物活性物质,,,在体内加入免疫应答、抗原提呈、细胞迁徙、细胞分解、肿瘤侵袭、促血管新生等心理历程,,,与多种疾病的爆发和历程亲近相关。。。。。。由于外泌体的特殊结构和功效,,,使得它具有潜在的应用价值,,,一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标,,,另一方面也可以作为治疗手段,,,未来有可能作为药物的自然载体用于临床治疗。。。。。。

怎样疏散外泌体 ?????

外泌体的样原泉源主要有细胞作育上清、血清/血浆、尿液、腹水、乳汁、脑脊液、唾液、滑液等,,,其中细胞作育上清、血清/血浆、尿液是最常见的泉源。。。。。。若是是使用细胞作育上清,,,要注重细胞作育中一定不可添加FBS。。。。。。

外泌体疏散要领有许多种,,,包括超速离心、过滤离心、密度梯度离心、免疫磁珠和商用试剂盒。。。。。。可是这么多要领中,,,我们通常推荐选用超速离心法举行提取和疏散,,,由于超速离心要领获得的外泌体不管是从得率照旧纯度上都较量好。。。。。。其他要领的特点如下:

1、过滤离心:得率较量低。。。。。。

2、密度梯度离心:办法繁琐,,,得率较低。。。。。。

3、免疫磁珠:特异性较量高,,,得率较低。。。。。。

4、商用试剂盒:价钱高,,,效果一样平常。。。。。。疏散出的外泌体电镜和粒径效果差。。。。。。

综合以上,,,超速离心法是现在价钱适中、得率和纯度都能兼得的一种要领。。。。。。

怎样判断外泌体 ?????

外泌体判断是进一步研究外泌体功效和机制的事情基础。。。。。。现在的判断要领主要包括透射电子显微镜(TEM)举行形态学视察、纳米颗粒追踪剖析(NTA)举行粒径和密度剖析、用WB举行卵白标记物的判断。。。。。。WB判断包括CD63、CD9、CD81、TSG101、Hsp70、syntenin1等。。。。。。


透射电镜图



纳米颗粒追踪剖析



WB

怎样研究外泌体 ?????

外泌体的研究偏向主要包括以下三个方面:

1、寻找疾病诊断和预后的分子标记物。。。。。。

2、展现疾病发病机制,,,从微情形角度诠释细胞之间通讯增进疾病爆发的缘故原由。。。。。。

3、外泌体作为药物载体,,,实现靶向给药。。。。。。

针对寻找分子标记物,,,通常的研究思绪如下:


针对疾病研究,,,常见的研究思绪如下(以外泌体miRNA为例):




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