【on-target】AAV熏染脂肪组织 | 血清型·启动子·注射用量 | 一篇就GO了！
脂肪组织（Adipose tissue）是一种松散的结缔组织，，，，主要由脂肪细胞组成。。。。脂肪组织的主要作用是以“脂肪”的形式贮存能量，，，，亦可为身体作缓冒犯击及生涯热量。。。。脂肪组织也是身体一个主要的内渗透系统器官，，，，为身体制造激素，，，，调理全身代谢稳态。。。。肥胖、2型糖尿病、心血管疾病和胰岛素对抗等疾病的爆发与脂肪组织代谢障碍有关。。。。因此，，，，借助先进手艺睁开对靶向脂肪组织的基因疗法对相识脂肪功效及代谢至关主要。。。。
脂肪细胞类型及脂肪组织漫衍（PMID: 33793327）
重组腺相关病毒载体（recombinant Adeno-associated virus, rAAV）具有血清型种类多样、免疫原性低、恒久稳固表达基因、宿主规模广等优势，，，，在基因功效研究和基因治疗递送载体中占有主导职位。。。；；；；；谧蚨锏木窒扌，，，，借助AAV载体高效熏染脂肪组织研究基因功效成为越来越多研究者的选择。。。。
01 AAV血清型的选择
AAV血清型种类多样，，，，AAV1、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9等血清型被报道常用于定点注射熏染脂肪组织，，，，其中AAV8血清型通过定点注射在小鼠脂肪组织的转导效率更高，，，，表达时间更长。。。。
scAAV2/8肩胛骨定点注射和腹股沟定点注射熏染脂肪组织
脂肪组织遍布全身，，，，调理全身代谢稳态，，，，接纳定点注射难以大规模熏染全身脂肪组织。。。。AAVRec2血清型可以通过系统注射途径实现高效、特异转导脂肪组织。。。。别的，，，，差别的给药方法也会影响AAVRec2血清型对脂肪组织的靶向性，，，，接纳口服给药时，，，，AAVRec2血清型优先熏染棕色脂肪组织；；；；；接纳腹腔给药时，，，，AAVRec2有用转导内脏脂肪。。。。
rAAV2/8和AAVrec2熏染脂肪组织
UG环球生物可提供AAV1-9、AAVRec2等几十种AAV血清型病毒包装效劳。。。。
02 启动子选择
脂肪组织主要由脂肪细胞组成，，，，脂肪细胞可细分为三种细胞类型:白色、棕色和米色脂肪细胞。。。。除脂肪细胞外，，，，脂肪组织中还含有前脂肪细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞及多种免疫细胞等，，，，它们统称为基质血管因素细胞（ stromal vascular fraction cells，，，，SVF）。。。。因此，，，，关于脂肪细胞的特异性熏染可以借助脂肪细胞特异性启动子—AdipoQ（脂联素，，，，Adiponectin）实现。。。。
AdipoQ启动子特异性熏染脂肪组织
UG环球生物可提供CBh、CAG、CMV、EF1a等普遍表达启动子，，，，亦可提供特异性熏染脂肪细胞的AdipoQ特异性启动子，，，，资助您构建高效、特异性靶向脂肪组织的rAAV载体。。。。
03 注射方法的选择
脂肪定点注射（PMID: 30783987）
04 AAV注射剂量
| 注射方法 | 血清型 | 启动子 | AAV用量 | 注射体积 |
| 定点注射 | rAAV2/8 | 广谱启动子：CBh/CMV/CAG/U6等 | 0.5-1E+11vg | 20-40μL，，，，多点注射 |
| 脂肪细胞特异启动子：AdipoQ | ||||
| 腹腔注射 | AAVRec2 | 广谱启动子：CBh/CMV/CAG/U6等 | 1-2E+11vg | 100μL |
05 应用案例
借助rAAV2/8载体搭载Slpi滋扰载体（AAV-shSlpi），，，，同时右侧注射比照病毒（同鼠比照），，，，发明下调Slpi的表达可以影响Mecp2Adi KO小鼠体内细胞棕色化征象，，，，并降低产热基因的表达量。。。。（【Diabetes】燃脂！黄昆 /郑凌团队展现甲基化连系卵白Mecp2调控食物诱导肥胖的分子机制）
下调Slpi 表达影响脂肪细胞棕色化（PMID: 31597640）
| 病毒产品 | AAV8-shSlpi |
| 实验动物 | Mecp2Adi KO小鼠 |
| 注射方法 | 腹股沟定点多点注射 |
| 熏染部位 | 腹股沟脂肪 |
| 病毒用量 | 2E+11VG |
| 检测时间 | 3周 |
06 脂肪组织
脂肪组织（Adipose tissue）遍布全身，，，，主要由脂肪细胞组成。。。。脂肪细胞可细分为三种细胞类型:白色、棕色和米色脂肪细胞，，，，它们的结构、位置和功效各不相同。。。。凭证脂肪细胞的类型，，，，脂肪组织可分为白色脂肪组织（主要由白色和米色脂肪细胞组成, White Adipose Tissue, WAT）和棕色脂肪组织（由棕色脂肪细胞组成, Brown Adipose Tissue, BAT）。。。。WAT是人体脂肪的主要类型，，，，主要漫衍于皮肤（皮下脂肪，，，，如腹股沟脂肪，，，，富含白色和米色脂肪细胞）、子宫和卵巢（雌性）或附睾和睾丸（雄性）（性腺脂肪），，，，内脏器官周围（内脏脂肪）、骨中央腔（骨髓脂肪），，，，主要作用是贮存能量；；；；；BAT主要漫衍于背部、锁骨上方（肩胛骨脂肪），，，，椎骨周围，，，，其主要作用为产热。。。。
脂肪组织漫衍（PMID: 29320705）
参考文献
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[2]Methods Mol Biol. 2019;1950:389-405.doi: 10.1007/978-1-4939-9139-6_23.
[3]Diabetes. 2020 Jan;69(1):35-47.doi: 10.2337/db19-0502.
[4]Cell Metab. 2018 Jan 9;27(1):252-262.e3.doi: 10.1016/j.cmet.2017.12.004.
[5] Methods Mol Biol. 2017;1566:109-124.doi: 10.1007/978-1-4939-6820-6_11.
[6]Methods Mol Biol. 2019;1950:389-405.doi: 10.1007/978-1-4939-9139-6_23.
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[8]Mol Ther Methods Clin Dev. 2020 Sep 20;19:236-249.doi: 10.1016/j.omtm.2020.09.009.
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