溶瘤病毒（Oncolytic Virus）是一类基于多效作用模式的奇异抗癌药物 ， ，，，，，除了病毒诱导的肿瘤细胞裂解之外 ， ，，，，，还可以激活体内肿瘤免疫反应。。。这些经由基因刷新的多种溶瘤病毒产品已逐步进入临床试验阶段 ， ，，，，，个体产品已进入光临床III期。。。溶瘤病毒疗法在为试验差别的治疗计划提供时机的同时 ， ，，，，，也给产品的临床转化带来了挑战。。。本篇文章将分上下两个篇章 ， ，，，，，以六种在临床试验中使用的溶瘤病毒产品为例 ， ，，，，，形貌了溶瘤病毒产品临床级别生产的要求和挑战。。。鉴于先前FDA对溶瘤病毒药物T-Vec的审批上市 ， ，，，，，进一步扩大溶瘤病毒的制造规模 ， ，，，，，优化产品特征的战略将会受到人们越来越多的关注。。。
2015年 ， ，，，，，美国FDA对来自Amgen的I型纯粹疱疹病毒产品Imlygic（T-Vec）举行了批准上市 ， ，，，，，以用于玄色素瘤的治疗 ， ，，，，，成为第—个被业界普遍认可的溶瘤病毒药物 ， ，，，，，并作为在手术切除、化疗、放疗、靶向性小分子和抗体类药物治疗之外一类新的临床肿瘤学治疗手段。。。与古板临床肿瘤治疗方法差别的是 ， ，，，，，溶瘤病毒接纳了其特有的作用机理举行针对肿瘤细胞的病毒熏染、复制、细胞裂解和扩散撒播。。。溶瘤病毒药物在近期的临床和临床前研究中批注晰多效治疗活性 ， ，，，，，包括：1）溶瘤病毒指导的肿瘤细胞裂解在动物模子和临床患者体内中被证实可以触发全身性肿瘤免疫反应；；；；；；2）治疗性目的基因的插入可以通过多种途径触发肿瘤细胞殒命；；；；；；3）肿瘤组织血管内皮细胞对溶瘤病毒敏感 ， ，，，，，从而导致并间接摧毁肿瘤细胞。。。作为一种多功效的治疗方法 ， ，，，，，溶瘤病毒产品为异质性肿瘤的治疗 ， ，，，，，阻止耐药性的生长 ， ，，，，，以及多种治疗手段的联合治疗的应用提供了希望和时机。。。
现在 ， ，，，，，除了以T-Vec为代表的纯粹疱疹病毒之外 ， ，，，，，尚有多种病毒产品也进入到了临床试验阶段 ， ，，，，，并展现出优异的潜力。。。这些溶瘤病毒在病毒结构、巨细、基因组、复制机制和宿主相互作用方面均保存差别和多样性 ， ，，，，，而这些多样性也更进一步为研究者们提供了对溶瘤病毒举行刷新的时机。。。可是 ， ，，，，，与此同时 ， ，，，，，溶瘤病毒的多样性也为研究职员带来了临床转化的挑战 ， ，，，，，清静性问题以及GMP级生产需要针对每种病毒产品举行讨论剖析。。。
Fig 1. 多样化的溶瘤病毒及其作用机理
（Ungerechts, G. et al. Moving oncolytic viruses into the clinic: clinical-grade production, purification, and characterization of diverse oncolytic viruses. Molecular Therapy - Methods and Clinical Development 3, 16018 (2016)）
溶瘤腺病毒 （Oncolytic Adenovirus）
基于优异的裂解活性和对其结构与复制周期的一直研究 ， ，，，，，腺病毒被视为一种有吸引力的溶瘤病毒候选者。。。腺病毒是一种无包膜的双链DNA病毒 ， ，，，，，具有中等基因组大。。。▇30-40kb） ， ，，，，，可熏染的细胞规模普遍。。。其基因组在熏染的历程中不会整合宿主细胞的染色体中 ， ，，，，，且病毒滴度高 ， ，，，，，较易于纯化和制备。。。现在已有多种溶瘤腺病毒已经进入到了临床试验阶段 ， ，，，，，其中CFDA在2005审批通过了溶瘤腺病毒安珂瑞（H101）上市 ， ，，，，，用于治疗以鼻咽癌为主的头颈部肿瘤。。。
与任何的新型肿瘤疗法一样 ， ，，，，，溶瘤腺病毒从实验室光临床试验阶段的转化历程 ， ，，，，，均受制于有关详细划定 ， ，，，，，并且必需知足关于选择性、药效、稳固性和产品表征的明确标准 ， ，，，，，应特殊注重稳固的GMP工艺流程 ， ，，，，，包括主细胞库的建设、主毒株库的建设和建设严酷稳固的质量放行标准。。。在溶瘤腺病毒的生产中 ， ，，，，，部学生产者会使用HEK293细胞 ， ，，，，，以获得较高的病毒滴度。。。可是 ， ，，，，，这些细胞具有腺病毒E1基因的插入位点 ， ，，，，，DNA的重组整合很可能导致E1基因对野生型的修饰被退回。。。别的 ， ，，，，，另一个挑战是对使用的主细胞库和主毒株库的一连监控 ， ，，，，，包括对细胞属性和污染物的监控。。。
疱疹病毒 （Herpes Virus）
纯粹疱疹病毒（HSV）是一种有包膜的双链DNA病毒 ， ，，，，，具有较大基因组（~150kb） ， ，，，，，适合较大的基因片断插入。。。HSV结构重大 ， ，，，，，在其包膜和衣壳之间被称为被膜（tegument）的区域 ， ，，，，，包括有20多种HSV卵白 ， ，，，，，对HSV的熏染性起到至关主要。。。其包膜外貌有12个糖卵白 ， ，，，，，衣壳也由7种差别的卵白质组成。。。因此 ， ，，，，，HSV重大的结构对生产制造提出了许多挑战。。。这些大尺寸（155 – 240 nm）的病毒 ， ，，，，，需要在纯化历程中坚持结构的完整性 ， ，，，，，且对最终产品完整特征的权衡与形貌也提出了挑战。。。152kb巨细的基因组具有长区和短区的特有区域 ， ，，，，，每个区域都能侧接最后重复区域（重复区域为某些HSV基因多次保存 ， ，，，，，如ICP34.5） ， ，，，，，它们相对相互保存4个可能的排列偏向 ， ，，，，，而每一种排列偏向都意味着一种异构体的保存。。。这些特征都使得对HSV基因组周全测定权衡越发重大。。。
麻疹病毒 （Measles Virus）
基于减毒疫苗株的溶瘤麻疹病毒处于现阶段的临床试验研究中 ， ，，，，，作为一种潜在的癌症治疗方法 ， ，，，，，诱导免疫介导的肿瘤倾轧反应。。。溶瘤麻疹病毒是优先通过在恶性肿瘤细胞外貌过表达的膜卵白CD46进入肿瘤细胞。。。与使用麻疹病毒作为疫苗所差别的是 ， ，，，，，麻疹病毒的溶瘤活性取决于高浓度的熏染性颗粒的保存 ， ，，，，，整个生产和纯化历程必需在温柔的GMP和无菌条件下举行。。。现阶段的批次制备只管已经切合了临床要求 ， ，，，，，但纯度有进一步的提高空间。。。
目今 ， ，，，，，业界正在追求多种战略来提高麻疹病毒制剂的总产量和纯度。。。使用微载体作育或是切换到悬浮作育有希望提高病毒滴度。。。另外 ， ，，，，，开发与麻疹病毒相容的色谱提纯手艺 ， ，，，，，如离子交流色谱 ， ，，，，，可作为提高与颗粒无关的核酸和卵白质杂志的去除率的一个选项 ， ，，，，，从而提高临床用溶瘤麻疹病毒的批次产量。。。
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