稳固细胞株构建
外源基因在细胞中的表达可分为两大类，，， ，，一类是瞬时表达，，， ，，外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，，， ，，虽然可以抵达高水平的表达，，， ，，但通常只一连几天；；一类是稳固表达（构建稳转株），，， ，，外源DNA整合到宿主细胞染色体上，，， ，，使宿主细胞可恒久表达目的基因。。。。。
建设稳固细胞株，，， ，，基来源理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，，， ，，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，，， ，，用载体中所含的抗性标记举行筛选。。。。。最常用的真核表达载体的抗性筛选标记物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，，， ，，筛选获得可稳固表达目的卵白、或稳固默然特定基因的细胞株。。。。。
筛选要领
慢病毒熏染筛选稳固细胞株
使用慢病毒整合表达特征来筛选稳固细胞株，，， ，，该要领战胜了古板质粒挑单克隆要领周期久的误差，，， ，，可以在短时间内高效获取稳固细胞株。。。。。
使用慢病毒制备稳固株优势
（1）细胞适用种类普遍，，， ，，可用于州哺乳动物细胞；；
（2）构建稳转株时间短，，， ，，表达一连时间长；；
（3）多种荧光标记和抗性基因可选，，， ，，知足视察实验要求。。。。。
HUVEC
HepG2
稳固细胞株分类
混淆克隆稳固细胞株
混淆克隆细胞系是基因转染后直接用抗药筛选获得的，，， ，，筛选出的细胞都表达抗性基因和目的基因，，， ，，但包括了州差别的细胞克隆。。。。。差别克隆的目的基因整合位置和表达量均有所差别。。。。。
混淆克隆细胞株筛选较量快速，，， ，，用度较低。。。。。在需要构建的细胞株转染效率高，，， ，，目的基因表达效率高的情形下，，， ，，单克隆细胞株最后获得的表达效果和混淆克隆细胞株并没有显著差别，，， ，，这时多克隆细胞筛选是理想的选择。。。。。
单克隆稳固细胞株
单克隆细胞系是由含有稳固整合外源片断的单个细胞的扩增获得的细胞株，，， ，，每个细胞的目的基因整合位置的表达量均高度一致，，， ，，但可能丧失一些表型。。。。。单克隆细胞株筛选周期长，，， ，，用度高。。。。。需要举行细胞亚定位实验的细胞系，，， ，，难熏染的和表达率低的通常建议举行单克隆细胞筛选。。。。。
