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Cre全系列产品——你想要的我都有

2022-03-03 09:54

Cre/loxP系统简介

泉源于噬菌体P1的Cre/loxP系统主要包括2个主要组成部分:一个是loxP位点,,,另一个就是可以对loxP位点举行识别的Cre酶,,,可以实现对目的基因删除、翻转、易位和序列交流 。。。使用特异性的启动子使Cre酶在特异性的组织器官表达,,,实现对特定的组织或细胞的基因的操作,,,同时可以在Cre/loxP系统中添加ERT2,,,实现在特准时间对目的基因的操作 。。。(更多Cre系统相关内容,,,可参考【知识分享】一半海水、一半火焰,,,分子表达操控中高频泛起的Cre、Flp、Dre等重组酶系统怎样事情)

病毒载体介导的Cre/loxP系统,,,除了具备以上特点之外,,,相较于转基因小鼠,,,可以大大缩短实验的周期 。。。另外,,,多种多样的病毒载体,,,可以很大限度的知足种种实验的需求 。。。州病毒载体的特点如下:

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病毒载体介导的Cre/loxP系统应用案例

使用ADV介导的Cre系统可以实现对特定组织器官的快速敲除 。。。美国爱因斯坦医学院的Rajat Singh团队[1],,,使用ADV载体携带Cre酶基因,,,注射到Atg7f/f工具鼠棕色脂肪组织,,,对脂肪组织Atg7基因举行编辑,,,5天后对Atg7表达举行剖析,,,Atg7显著镌汰 。。。

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使用LV介导的Cre系统整合至基因组的特征,,,可以实现稳固细胞株的构建 。。。荷兰马斯特里赫特大学医学中心Anita Kneppers研究团队[2],,,使用LV病毒载体构建了一种基于Cre/loxP的细胞融合报告系统,,,实现成肌细胞-肌管融合后荧光素酶的条件表达 。。。

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rAAV具有免疫原性低、多血清型、长时间表达等特点,,,在体内研究中普遍应用 。。。德国慕尼黑大学Oliver J. Muller 研究团队[3]使用AAV-TnT-Cre特异性对成年小鼠心脏的基因举行敲除,,,从而替换MerCreMer-Tamoxifen系统,,,阻止Tam对心脏功效爆发的副作用 。。。

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scAAV即自互补AAV,,,填补了rAAV病毒载体表达较慢的弱点,,,熏染3天后即可表达,,,同时可长时间稳固表达 。。。德国慕尼黑工业大学Stefan Engelhardt研究团队[4],,,使用scAAV-iCre对miR-29 b2cfl/fl 小鼠心肌细胞的miR-29 b2c举行特异性敲除 。。。

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